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小腸鏡檢查分為2次進行，首先從口側進入，如同胃鏡一樣，先到十二指腸，之后逐步向空腸進鏡檢查，進鏡時盡量向深處觀察，同時根據情況進行活檢等。之后到達鏡子不能前進的位置，會使用組織夾進行標記。其次再從肛門進鏡，可以做完口側的同時進行，也可以分時間進行，根據病人的耐受程度進行。從肛側進鏡，先觀察結腸，再從小腸進鏡，盡量找到組織夾所在位置，則可以將所有小腸全部觀察完整。小腸鏡檢查需要清腸處理，并且操作時間較長，痛苦也較大。因此目前有些檢查是膠囊內鏡檢查，膠囊內鏡是大拇指粗細的膠囊，含有攝像頭、電源，具有拍照裝置，會將照片傳到體外，在接收照片以后進行評判分析，但是膠囊內鏡不能取活檢。小腸鏡的操作主要是用于不明原因的出血，排除胃和結腸，明確小腸病變時需要先進行小腸鏡檢查。